模型构建的目的
NAFLD的发病机制：脂质代谢紊乱、炎症反应、氧化应激、胰岛素抵抗等。
疾病进程：从单纯性肝脂肪变性到NASH、肝纤维化的病程演变。
药物筛选与治疗：评估不同药物在改善肝脂肪变性、抗炎及抗纤维化方面的疗效。
2.大鼠/小鼠NAFLD模型的常见构建方法
2.1高脂饮食诱导模型
高脂饮食诱导模型是最常用的构建NAFLD的方式，能够有效诱导肝脏脂质的异常积聚
及胰岛素抵抗。实验设计：动物选择：通常使用C57BL/6小鼠、Wistar大鼠或SD大鼠。
饲料组成：高脂饲料通常含有40%-60%的脂肪，以动物脂肪（如猪油、牛油）为
主，部分饲料中还可能含有高糖成分（如果糖、蔗糖）。
操作方法：动物自由摄食高脂饲料，持续8-16周（小鼠）或12-24周（大鼠）。随着时间的推
移，动物体重增加，逐渐发展为脂肪肝。
每周监测动物的体重、血脂、血糖及胰岛素水平。
模型特点：动物表现出体重增加、脂质代谢紊乱、肝脏脂肪堆积，适合研究NAFLD的早期阶段。
肝脏病变包括脂质滴沉积、肝细胞肥大，但可能缺乏明显的肝纤维化或严重的炎症。
2.2高脂高糖饮食诱导模型
为了加速NAFLD的进展，高脂高糖饮食结合喂水中的高果糖可以更快地诱导肝脂肪变
性和胰岛素抵抗。操作方法：除高脂饲料外，饮水中加入10%-30%的果糖或蔗糖，持续喂养8-16周。
高糖饮水可以加速肝脏的脂质积聚和炎症反应。
模型特点：动物在较短时间内发展为肥胖、严重的肝脂肪变性及胰岛素抵抗。
适合研究从单纯性脂肪变性向NASH过渡的机制。
2.3化学药物诱导模型
化学药物诱导可以通过引发肝损伤及代谢紊乱来模拟NAFLD的病理过程，常与高脂饮
食联合使用。四氯化碳（CCl?）诱导：原理：CCl?是一种肝毒性化合物，能够诱导肝细胞损伤、脂质代谢紊乱及纤维化。
操作方法：每周两次腹腔注射CCl?（1mL/kg，稀释于橄榄油中），同时喂食高脂饮
食，持续6-8周。
特点：肝脏出现脂肪沉积及炎症反应，并逐渐发展为纤维化，适合研究NAFLD向
NASH进展的过程。
链脲佐菌素（STZ）联合高脂饮食：原理：STZ可引发胰岛素抵抗，联合高脂饮食可导致严重的肝脂肪变性。
操作方法：小鼠在高脂饮食基础上，腹腔注射STZ（50mg/kg），可有效诱导糖尿病
和NAFLD。
2.4遗传模型
一些小鼠品系通过基因操作，模拟了代谢综合征和NAFLD的发生。例如：
ob/ob小鼠：缺乏瘦素基因，表现出严重的肥胖和胰岛素抵抗，适合研究NAFLD的早
期阶段。
db/db小鼠：缺乏瘦素受体，同样表现出严重的代谢紊乱和脂肪肝。
3.NAFLD模型的评估方法
3.1体重及代谢指标监测
定期监测动物体重、空腹血糖、胰岛素水平、血脂（如甘油三酯、总胆固醇等）以评
估代谢紊乱情况。
3.2肝脏脂肪沉积的评估
组织学检查：取肝脏组织，进行HE染色、OilRedO染色，观察脂质滴的大小及分布。
Masson染色可用于观察纤维化程度。
生化分析：提取肝脏组织，通过比色法测定肝脏中的甘油三酯和总胆固醇含量，评估脂肪堆积。
3.3炎症及氧化应激评估
血清生化指标：
测定血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平，评估肝损伤情况。
免疫组化：
检测肝脏组织中炎症因子（如TNF-α、IL-6）的表达，评估炎症反应的程度。
同时可以检测氧化应激相关指标（如MDA、SOD活性）。
3.4纤维化评估
使用SiriusRed染色或Masson染色检测肝脏纤维化的发生。
可以通过WesternBlot或免疫组化检测纤维化标志物（如α-SMA、TGF-β等）。
4.大鼠/小鼠NAFLD模型的应用
4.1NAFLD病理机制研究
通过大鼠/小鼠模型，可以深入研究脂质代谢紊乱、胰岛素抵抗、氧化应激、炎症及纤
维化在NAFLD发病中的作用，明确这些因素的相互关系，为临床治疗提供理论依据。